1實(shí)驗(yàn)部分
1．1儀器與試劑
氣相色譜儀GC7890B，F(xiàn)ID檢測器;色譜柱:SPTM-238030m×0．25mm×0．2μm石英毛細(xì)管柱;手動微量進(jìn)樣器5μl;萬分之一電子天平;氫氣發(fā)生器;空氣發(fā)生器;N2(99．999%)。脂肪酸 甲 酯 標(biāo) 準(zhǔn) 物 質(zhì):純 度99.5%±0．5%) ;石油醚+**(1+1) ;0．5mol/L氫氧化鉀—甲醇溶液。所用試劑均為分析純。
1．2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
稱取0．200g脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品于10ml容量瓶中，用5．0ml石油醚+**(1+1)振蕩溶解即可。
1．3樣品來源及樣品處理
1．3．1樣品來源
實(shí)驗(yàn)中所用菜籽油來源于宣漢縣東鄉(xiāng)鎮(zhèn)某加工坊(食品級) ，棉籽油購于市場(食品級)。
1．3．2樣品處理
1．3．2．1配制模擬摻偽油樣
按質(zhì)量百分比分別配制不同比例的模擬摻偽油樣，棉籽油含量分別為0、5%、10%、20%、30%和100%。將摻偽菜籽油置于試管中，并充分渦旋混合，使其混合均勻。
1．3．2．2甲酯化
取約0．200g油樣，置于10ml圓底燒瓶中，用5．0ml石油醚+**(1+1)邊振蕩邊溶解，靜止10min，再加入4．0ml0．5mol/L氫氧化鉀—乙醇溶液混勻后靜止10min以上，加入1．0ml蒸餾水振蕩，靜止10min以上，取上清液1．0μl進(jìn)行分析。
1．4測定方法
1．4．1色譜操作條件的選擇
進(jìn)樣:分流比為1∶36，進(jìn)樣量為1μl，進(jìn)樣口溫度220°C。
載氣:純度99．999%的氮?dú)猓d氣流量為30ml/min。
燃?xì)?H2為30ml/min，Air為300ml/min。
色譜柱:SPTM-238030m×0．25mm×0．2μm石英毛細(xì)管柱。
升溫程 序:140°C保 持2min，然 后 以5°C/min的 速 度 升 溫 至180°C，保持1min，以5°C/min的速度升溫至220°C，汽化加熱器220°C。
檢測器:氫火焰離子化檢測器(FID) ，溫度為220°C。
1．4．2數(shù)據(jù)處理方法
取1．0μl脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品待測液進(jìn)行色譜儀分析，以各脂肪酸甲酯的保留時間定性，采用峰面積校正歸一化法計算植物油各種脂肪酸成分的相對百分含量，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法(配制不同濃度模擬摻偽植物油，測定其脂肪酸組成與含量)或計算法求出單組分的含量，再計算其摻偽量。
2結(jié)果與討論
2．1純菜籽油、純棉籽油和混合油樣的氣相色譜測定及分析峰面積與濃度成正比
見圖1～3。
由圖1可知，棕櫚酸、油酸、亞油酸、亞麻酸、芥酸、花生一烯酸是菜籽油中zui主要的脂肪酸成分，棕櫚酸、油酸、芥酸和花生一烯酸的總含量高達(dá)95．58%。
由圖2可知，棉籽油中的主要脂肪酸為棕櫚酸、油酸、亞油酸等。棕櫚酸、油酸、亞油酸的總量高達(dá)94．9%，其中棕櫚酸、亞油酸比純菜籽油的含量高出很多，其他組分都比純菜籽油的含量明顯低很多。
由圖3可知，樣品中亞油酸的含量較純菜籽油有較明顯的增加，芥酸的含量也有微小的下降。
2．2菜籽油中摻棉籽油后的主要脂肪酸組成及含量
根據(jù)脂肪酸甲酯在色譜圖上的出峰規(guī)律，即脂肪酸甲酯色譜峰按碳原子數(shù)目的增加的次序出現(xiàn)，如碳原子數(shù)目相同，則按不飽和度增加的次序出現(xiàn)，可推得各油樣中主要脂肪酸組成及含量。純菜籽油中摻不同含量的棉籽油后的主要脂肪酸組成及含量見表1。
從表1可以看出，當(dāng)棉籽油摻入到菜籽油中時，菜籽油的脂肪酸組成和含量就會發(fā)生改變，雖然一些組分改變的程度不大，但摻偽油的特征組分改變就很明顯，如棕櫚酸C16∶0，因此可以把它作為摻偽定性物。當(dāng)被測油的各組分含量不在GB1536－2004菜籽油的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的范圍內(nèi)時，就可以認(rèn)為此油摻偽了。
由于菜籽油和棉籽油的脂肪酸組成及含量不同，摻偽油中的各脂肪酸含量呈現(xiàn)上升或者下降的趨勢。如表所示，我們選擇棕櫚酸作為菜籽油中摻棉籽油時的特征脂肪酸來進(jìn)行計算，計算公式為:X=(A－B)/(C－B)×100%
式中:X—為摻入某油脂的摻偽率，%;A—樣油中特征組分的百分含量，%;B—純油特征組分 百 分 含 量，%;C—摻入油脂特征組分百分含量，%。
實(shí)驗(yàn)表明:計算結(jié)果與模擬摻偽情況基本吻合，zui大相對誤差在5%以內(nèi)，具體測定結(jié)果見表2。
由于只依靠一種特征脂肪酸的變化規(guī)律來判斷菜籽油的摻偽情況，有時也很難對于摻偽油品進(jìn)行準(zhǔn)確的定性及定量，由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，摻偽后油樣中其他種脂肪酸也呈現(xiàn)一定的規(guī)律變化，因此，也可計算其他幾種主要的脂肪酸含量，以便對于摻偽油樣進(jìn)行準(zhǔn)確分析。2．3菜籽油摻偽棉籽油檢測的工作曲線見圖4。
3結(jié)論
當(dāng)菜籽油中摻 入 棉 籽 油 時，用堿式甲酯化方法對油脂樣品進(jìn)行酯化，再用氣相色譜法測定其中各脂肪酸的含量，可根據(jù)樣品中棕櫚酸的含量的變化來定量檢測菜籽油是否摻混棉籽油。
在線咨詢