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液相色譜儀過濾技巧
更新時(shí)間:2019-09-12   點(diǎn)擊次數(shù):3530次

任何顆粒物進(jìn)進(jìn)液相色譜儀后都會(huì)在柱子進(jìn)口端被篩板擋住,后的結(jié)果是將柱子堵塞,表現(xiàn)出的特征是系統(tǒng)壓力增加并使色譜峰變形。因此,要采取各種預(yù)防 措施,包括操縱步驟和商品儀器自身的各種過濾設(shè)計(jì),努力防止或減少顆粒物進(jìn)進(jìn)液相色譜儀中,從而延長儀器和色譜柱的使用壽命,并進(jìn)步數(shù)據(jù)的可靠性。

液相色譜儀中,顆粒物的主要來源有三個(gè)途徑:活動(dòng)相、被測樣品和儀器系統(tǒng)部件的磨損物。
  
  1、被測樣品
  使用針筒式過濾器不可能100%得到通過過濾器的被測樣品,總會(huì)或多或少的丟失。丟失來自這樣幾方面:過濾器濾膜的吸附、過濾器濾出的顆粒物上的吸附、針筒式濾膜過濾器與針筒連接處的滲漏等?! ?br />  2、活動(dòng)相
  
   無論是液相色譜儀HPLC級(jí)的水還是在實(shí)驗(yàn)室使用超純水凈化系統(tǒng)制備的水,后一步也是通過0.2μm微孔濾 膜。任何一種緩沖液中加進(jìn)了固體物,必然活動(dòng)相過濾將。少量雜質(zhì)顆粒存在于活動(dòng)相中必然成為殘?jiān)?br />  
  解決辦法:2. 1.活動(dòng)相制備僅采用HPLC級(jí)液體時(shí)不需要過濾,反之所有活動(dòng)相組成在使用前必須過濾。
  
  2.2在連接儲(chǔ)液瓶和泵的輸液管的末端進(jìn)口采用下沉式過濾器(常見材質(zhì)有熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬的兩種)也是很重要的。這個(gè)過濾器的規(guī)格為≥10μm的微孔物質(zhì),所以它不能取代活動(dòng)相過濾步驟,但是它能除往系統(tǒng)中的塵土并保證儲(chǔ)液瓶、輸液管使用的可靠性。
  2.3.推薦在HPLC系統(tǒng)中采用一個(gè)0.45 或0.5μm的在線多孔過濾器,接在自動(dòng)進(jìn)樣器和柱子之間,即使已使用了保護(hù)柱。這個(gè)在線過濾器將成為擋板代替柱頭的濾板,而且如采用一個(gè)玻璃砂芯濾板, 既便宜,更換又方便(幾分鐘就可更換)。若采用在線過濾,液相色譜儀檢測每批樣品開始前記錄下壓力值,當(dāng)壓力上升一定值,例如25%或增加 500psi,應(yīng)該更換玻璃砂芯濾板了,更換以后沖洗幾分鐘系統(tǒng)將恢復(fù)到原來的壓力值。


  3、儀器系統(tǒng)部件的磨損物
  
  后,在液相色譜儀HPLC系統(tǒng)中顆粒物的另一個(gè)主要來源是輸液泵密封墊和進(jìn)樣閥旋轉(zhuǎn)軸的磨損。關(guān)于輸液泵密封墊的磨損更換有兩種不同建議。
  
3.1、在一般實(shí)驗(yàn)室中輸液泵密封墊通常使用壽命為六個(gè)月到一年,因此建議半年或一年更換這些密封墊。  
3.2、原裝密封墊的密封效果,更換以后輕易引起活動(dòng)相滲漏。所以,只要不漏液就不要輕易更換密封墊。

 

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