色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，結(jié)合色譜及質(zhì)譜的技術(shù)，是目前分離和鑒定的重要的分析方法之一。其中液相色譜-質(zhì)譜儀應(yīng)用更為廣泛，液相色譜除了能分析一般的化合物，還能分析氣相色譜不能分析的強極性、熱不穩(wěn)定性、難揮發(fā)的化合物。液相色譜質(zhì)譜儀由色譜儀、接口、質(zhì)譜儀、電子系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)和計算機系統(tǒng)六大部分組成，是一種的檢測儀器，儀器的良好工作狀態(tài)是檢測準(zhǔn)確度的一個重要影響因子。為了保證儀器有一個良好的狀態(tài)，保證檢測結(jié)果的可靠性，需要正確合理的使用和維護儀器。下面以液相色譜儀為例，從儀器進樣系統(tǒng)、色譜柱系統(tǒng)等各個系統(tǒng)的日常維護保養(yǎng)進行詳細(xì)闡述，并對使用過程中容易遇到的問題進行分析，提出解決方法。
液相部分的維護
開機注意事項
要求使用220?V單相交流電。如發(fā)生斷電，不管任何原因造成的，先關(guān)閉儀器面板左下角的開關(guān)，等待供電恢復(fù)10分鐘以上再開啟電源，否則有可能燒毀電路板。儀器運行時需提供純度>99%的氮氣作為噴霧與干燥氣，輸出壓力為0.6～0.7?MPa。實驗開始前先檢查液氮罐液體存量是否充足。儀器開機時，確認(rèn)電源已經(jīng)連接而且氣振閥處于關(guān)閉，打開儀器總電源，隨后將前面板左下方的電源按鍵按下，真空泵即開始工作。大約2～3分鐘后，儀器內(nèi)置的系統(tǒng)啟動完畢，可以開啟Mass hunter軟件與儀器通訊。等待四極桿溫度達到100℃，高真空達到4×10-5??Torr之后，即可進行調(diào)諧或開始實驗。在儀器開始抽真空時，請不要打開前級泵上的氣振閥，否則可能因為回油污染真空腔體內(nèi)部。
流動相的要求
每次開機前，保證超純水和流動相的新鮮，泵的各個管路不應(yīng)余留上次殘留的溶劑。流動相需符合HPLC與LC-MS要求等級，流動相中盡量加易揮發(fā)的鹽，盡量不使用表面活性劑之類，否則容易導(dǎo)致離子抑制，表面活性劑產(chǎn)生的加合物和離子簇會干擾質(zhì)譜數(shù)據(jù)。如果遇到離子抑制，可以把樣品峰往后推或者改變提取方法，或者考慮用APCI源。盡量不使用無揮發(fā)性的緩沖劑，例如，磷酸緩沖劑等，磷酸鹽及其他不揮發(fā)緩沖鹽在離子源會沉淀并堵塞毛細(xì)管等。另外液質(zhì)不能承受過大流速。溶劑瓶避免陽光直射。
樣品的要求
保證樣品的清潔，進樣前盡量使用0.22?µm的濾膜濾過，避免樣品太臟而堵塞色譜柱或離子源的毛細(xì)管;樣品溶劑必須是色譜純，應(yīng)該和流動相比例一致;進樣濃度不宜太高，因為太高濃度的樣品容易污染靈敏度高的儀器，進而影響檢驗結(jié)果。由于液質(zhì)的流速較小(ESI一般為0.2?mL/min)，所以配置樣品的溶劑強度不能太大，盡量小于起始比例，否則，會出現(xiàn)保留時間偏移、峰形扭曲等問題。
進樣系統(tǒng)的維護
對于液相色譜來說，無論是手動進樣還是自動進樣，都是使用六通閥進樣的。進樣裝置要求：密封性好，死體積小，重復(fù)性好，保證中心進樣，進樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小樣。六通閥使用及維護注意事項：①樣品溶液進樣前必須用0.45?µm濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。②轉(zhuǎn)動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動相受阻，使泵內(nèi)壓力劇增，甚至超過泵的限值壓力;再轉(zhuǎn)到進樣位時，過高的壓力將使柱頭損壞。③為防止緩沖鹽和樣品殘留在進樣閥中，每次分析結(jié)束后應(yīng)沖洗進樣閥。通?？捎盟疀_洗，或先用能溶解樣品的溶劑沖洗，再用水沖洗。注意：溶劑入口過濾芯為消耗品，尤其不可以使用超聲清洗，可以使用稀硝酸浸泡，然后用水沖洗至中性，以重復(fù)使用。
色譜柱系統(tǒng)的維護
在色譜操作過程中，需要注意下列問題：①色譜柱的選擇會直接影響混合物中組分的分離，所以一定要選用合適的色譜柱，在使用新柱前要在自己的液相色譜儀上進行性能測試，即使用色譜柱附帶的檢驗報告上測試條件和樣品來測定該色譜柱的柱效，并且在以后的使用中，應(yīng)時常對色譜柱進行測試。②柱子在使用過程中，不能碰撞、彎曲或強烈震動;避免壓力和溫度的急劇變化，機械震動和溫度的突然變化都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進行。③當(dāng)柱子和色譜儀聯(lián)結(jié)時，閥件或管路一定要清洗干凈，樣品前處理對于柱子使用壽命影響甚大，進樣樣品要提純過濾并且嚴(yán)格控制進樣量，可以使用保護柱。④注意色譜柱的pH值使用范圍，不能高溫下過長時間使用硅膠鍵和相;每天分析工作結(jié)束后，都要用適當(dāng)?shù)娜軇﹣砬逑粗?。若分析柱長期不使用，應(yīng)用適當(dāng)有機溶劑保存并封閉。
在線咨詢