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色譜柱清洗方法
更新時(shí)間:2017-08-18   點(diǎn)擊次數(shù):2998次

吸附的主要原因

  反相硅膠柱填充介質(zhì)(固定相)與樣品間常常會(huì)發(fā)生下列吸附現(xiàn)象:

 ?。?)    殘存硅醇基與堿性物質(zhì)間的離子吸附;(2) 硅膠表面的金屬雜質(zhì)與金屬配位物質(zhì)間的吸附;

 ?。?)    疏水性*的物質(zhì)在柱中的蓄積。以上現(xiàn)象,會(huì)引起反相色譜柱柱效下降、拖尾、重復(fù)性不良等狀況的發(fā)生

  清洗方法

  1、疏水性物質(zhì)的去除:使用有機(jī)溶劑(乙腈、甲醇、乙腈與THF的混合溶劑)進(jìn)行清洗。 考慮樣品成分對(duì)于有機(jī)溶劑的溶解性,選用比淋洗液濃度高的有機(jī)溶劑、或選用極性較低的有機(jī)溶劑進(jìn)行過(guò)柱清洗。這種情況下,有必要注意淋洗液中鹽的析出現(xiàn)象。

  2、堿性物質(zhì)(金屬配位物質(zhì))的去除:使用酸性水溶液與有機(jī)溶劑的混合液(0.1%磷酸、0.1%TFA/乙腈、甲醇的混合液)進(jìn)行過(guò)柱清洗。

  *一般來(lái)說(shuō),清洗時(shí)間可選擇為過(guò)柱5-10個(gè)柱體積便可。

  在附吸成分其吸附力*時(shí),即使進(jìn)行過(guò)清洗,柱性能也有可能得

  不到恢復(fù)。另外,請(qǐng)充分考慮淋洗液的pH值,以避免損壞色譜柱。

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